只是————我在想一件事嗷，退一万步讲，就算我们今天把提取纯度的问题解决了，就算接下来的逆转录、PCR体系全部都解决了，然後呢？」
顾亦舟皱着眉头。
易向晚接着说：「我们该如何验证呢？既然是胰腺癌早筛，那到了最後，验证模型是否有效的话，我们需要真正的患者样本吧？」
「而且，我们需要的是【看起来完全健康，但实际上刚患上极早期胰腺癌的患者的血】。」
其实这个问题，几个核心组员心里都有想过。
只是大家都在闷头干活，谁也没有捅破。
因为胰腺癌的隐蔽性极强。
当患者因为腹痛、黄疸去医院就诊时，往往已经是中晚期了。
极早期胰腺癌，患者自身没有任何症状，常规体检也查不出来。
所以，想要拿到这种样本，唯一的途径就是依靠完善的血清生物样本库。
就是医院长期保存大量体检人群的血清，几年後，当其中某些人被确诊为胰腺癌时，研究人员再把他们几年前还是健康状态时的血清找出来，用来测试江河的早筛模型，看看能不能在几年前的血液里发现异常的miRNA升高。
但现实是，08年的中国，没有医院拥有如此完善的高质量血清生物样本库。
协和也没有。
「所以，如果找不到验证数据，验证数据就没意义————」
「喝什麽？」顾亦舟打断了他。
「啊？哦，呃，可乐吧，可乐就好。」
易向晚接过冰可乐，在自己的脖子上滚了一圈，好凉。
而後他说道：「师兄，我说这个不是打击老大的意思，我的意思是————」
「行了，别解释了，想那麽多干嘛？这些问题是老大需要考虑的，我们现在的任务是把提取这关过了，别到了最後，老大从欧洲、从挪威、从美国把样本找来了，结果咱们连RNA都提不出来，那才叫丢人。
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「靠，也是啊！确实有点想太多了————」
两个人带着水回到实验室。
发现江河已经回来了，正站在NanoDrop的屏幕前。
而且王教授正在乖巧地汇报情况：「纯度提不上去，TrizoI的局限性，血清里的蛋白含量远超组织，吸取上清液的时候，不可避免地会带入杂质，如果要避免带入杂质，就只能吸取最表层的少量液体，但那样RNA的浓度又达不到下游PCR的要求，咋办？」
江河淡然道：「不早跟你们说过了？加糖原。」
实验室里的人都愣了一下。
老组员虽然听过江河讲这个事情，但是大家都不知道具体该怎麽执行啊————
「噢，怪我，讲的不够细。」
江河随後解释道：「在加入异丙醇沉淀之前，往水相里加入5微升浓度为5mg/ml的糖原作为共沉淀剂，不仅能作为载体帮助极微量的RNA聚集沉淀，还能让最後形成的沉淀团块变得肉眼可见，方便後续洗涤，减少丢失。」
陆晓林思考了一下，提出了疑问：「可是这解决不了杂质的问题啊，只要我们用移液枪吸水相，还是会吸到蛋白。」
江河回答：「所以，洗两遍，双重氯仿抽提，第一次加氯仿离心後，吸取上清液，移入新的离心管，然後，往吸出的这部分上清液里，再加一次等体积的氯仿，剧烈震荡，进行第二次离心，简单来说，牺牲第一次的取液量来换取纯度，然後再通过加入糖原共沉淀，把浓度拉回来。」
这下大家听懂了。
王晓晴在心里给自己点了个赞。
放弃思考，果然是正确的。
一听江河的就完
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